|
Please use this identifier to cite or link to this item:
http://hdl.handle.net/2282/266
|
| Title: | Listeria monocytogenes i lakseprodukter : utprøving av ulike påvisningsmetoder |
| Authors: | Sæbø, Mona
Klæboe, Halvdan |
| Issue Date: | 2002 |
| Abstract: | To lokaler (A og B) som produserer ferske laksefileter og røykelaks ble undersøkt med
hensyn på Listeria-bakterier i miljøet. Prøvene er tatt av fiskeavkutt fra utvalgte
foredlingsmaskiner. I tillegg ble det foretatt utprøving av ulike metoder.
For påvisning av Listeria spp. ble det brukt en tradisjonell metode med oppformering i
næringsbuljong og sekundært utstryk på selektive agarskåler i henhold til NMKL 136 2.
utgave 1999. CAMP-test ble brukt til å verifisere L. monocytogenes. Resultatene ble brukt
som referanse ved sammenligning med andre metoder.
Det ble gjennomført totalt 441 analyser fordelt på de to produksjonslokalene. Fra
lokale A ble det analysert 252 prøver. 97 av disse var fra ubehandlet fisk, mens 155 var fra
røyket fisk. I den røkte fisken ble det påvist L. monocytogenes og L. spp. i henholdsvis 15%
og 16% av prøvene. I den ubehandlede fisken ble det påvist L. monocytogenes og L.spp. i
henholdsvis 66% og 13% av prøvene. I lokale B ble det analysert 189 prøver fra ferske
laksefileter. L. monocytogenes og L. spp. ble påvist i henholdsvis 33% og 11% av prøvene.
Det ble i alt foretatt syv analyseserier fra uke 6 til uke 37, 2001. I uke 6 ble det i
lokale A påvist L. monocytogenes i 59% av prøvene og L. spp. i 22% av prøvene. I første
analyseserie i lokale B (uke 8) ble det påvist L. monocytogenes i 63% av prøvene, men det ble
ikke funnet L. spp. Bedriften har i løpet av perioden foretatt ulike hygieniske tiltak for å bedre
lokalenes sanitære forhold. Analysene tyder på at tiltakene har hatt en viss effekt.
Micro-ID® Listeria er en verifiseringstest som skiller de ulike Listeria-artene. Den
brukes i kombinasjon med hemolyse og CAMP-test. Testen ble brukt på 28 isolater. L.
monocytogenes ble påvist i 21 prøver og i 6 prøver ble det påvist L. innocua. En av isolatene
kunne ikke artsbestemmes. Micro-ID® Listeria kan være et alternativ til vanlige
sukkerforgjæringstester og andre biokjemiske enkelttester.
VIP-Listeria er en testbrikke som identifiserer L. spp. Ved positivt resultat må prøvene
verifiseres med andre metoder for å påvise L. monocytogenes. Testen ble brukt på 18 prøver.
I en av prøvene viste VIP-Listeria et falskt negativt resultat. Det ble undersøkt om
oppformering med Fraser-buljong kan brukes til VIP-Listeria testen. Det ble undersøkt 33
prøver. Resultatene viste av denne oppformeringsprosedyren ikke er egnet for VIP Listeria.
Rapid L'mono, et selektivt kromogent medie, ble brukt parallelt med Oxford- og
PALCAM-agar på 80 prøver. Mediet skiller L. monocytogenes, L. ivanovii og L. spp. Med
Rapid L’mono ble det isolert L. monocytogenes fra en prøve der det kun var funnet L. spp.
med NMKL 136. Rapid L’mono er et pålitelig og arbeidsbesparende medie som kan ha fordeler fremfor tradisjonelle medier i de tilfellene der L. monocytogenes er i mindretall i
blandingskulturer.
Det ble foretatt en funksjonstest av ProbeliaTM Listeria. Testen baseres på polymerase
chain reaction (PCR) og verifisering med ELISA. Metoden kan påvise L. monocytogenes etter
ett døgn. 20 prøver infisert med L. monocytogenes og 20 negative prøver ble testet. L
monocytogenes ble korrekt påvist i alle de infiserte prøvene, de ikke-infiserte prøvene gav
ikke utslag.
Two processing plants (A and B) producing fresh and smoked salmon were tested with
respect to occurrence of Listeria in the production environment. A total of 441 samples were
examined. At location A, 252 samples were examined, of which 97 were taken from
unprocessed fish and 155 from cold-smoked fish. In the unprocessed fish L. monocytogenes
and L. spp. was present in 66% and 13% of the samples respectively. For smoked fish,
comparative values were 15% and 16%. At location B, 189 samples were taken of
unprocessed fish. At this location, L. monocytogenes and L. spp. was present in 33% and 11%
of the samples respectively. From week 6 to 37, 2001, a total of seven analyses were
conducted. In week 6, analyses were done at location A showing the presence of L.
monocytogenes in 59% of the samples and L. spp. in 25% of the samples. In the first analyses
at location B in week 8, the presence of L. monocytogenes was found in 63% of the samples.
No presence of L. spp. was found at this stage. During the test period, management at the
processing plant initiated various hygiene precautions to improve the sanitary situation.
In the testing for Listeria spp. the traditional method of growth in nutritional broth and
application to selective agar dishes was employed according to standards in NMKL 136, 2. ed.
1999. The CAMP-test was used for verification of L. monocytogenes. The results were used
as a reference when comparing with other isolation methods. Micro-ID® Listeria is a method
of verification that differentiates between the various species of Listeria. The method is used
in combination with hemolyse and CAMP-tests. The method was used on 28 isolates. L.
monocytogenes was verified in 21 samples and L. innocua in 6 samples. VIP Listeria is a test
application to identify L. spp. A total of 18 tests were completed. In one sample, VIP Listeria
showed a false negative result. The study investigated the possibility of using the same
enrichment protocols for the VIP-Listeria as used for Oxford- and PALCAM-agar. Results
indicated that this procedure was not usable. Rapid L’mono, a selective chomogenious agar
dish, was used parallel to Oxford-agar, PACAM-agar and CAMP-test on 80 samples. This
medium differentiates between L. monocytogenes, L. ivanovii and L. spp. In this medium, L.
monocytogenes develops blue color and is easy to distinguish from other Listeria species.
With the use of Rapid L’mono, the test managed to isolate L. monocytogenes from a sample
whereas L. spp. was detected by the NMKL 136. A functional test was done of Probelia TM
Listeria. Twenty negative samples and 20 samples infected by L. monocytogenes were tested.
All tests showed a correct result. |
| Keywords: | Laks
Listeriabakterier |
| Document type: | Master's thesis |
| URI: | http://hdl.handle.net/2282/266 |
| Appears in Collections: | Mastergradsavhandlinger i natur-, helse- og miljøvern
|
This item is protected by a usage licens. All items in TEORA are protected by copyright.
|
|
